Kaj je PCR analiza za tuberkulozo

Inovativna metoda za odkrivanje mikroorganizmov, ki jo je izumil znanstvenik Cary Mullis konec prejšnjega stoletja - PCR analiza. Za svoje spise je prejel Nobelovo nagrado. Ta proces se v celoti imenuje verižna reakcija polimeraze. Sestoji iz obnove vrste mikroorganizma v biomaterialu z uporabo kratkih fragmentov DNA. To vam omogoča, da v zgodnji fazi odkrijete okužbo in takoj začnete z zdravljenjem, ne da bi pri tem povzročili resne simptome in zaplete.

Kaj je analiza

Diagnoza s PCR je pridobiti segmente patogene DNA iz biološkega materiala in jih poravnati v pravilno verigo. To omogoča identifikacijo mikroorganizma, kateremu pripadajo celice.

Postopek se izvaja v treh fazah: t

1. Zbiranje biološkega materiala.
2. Identifikacija in poravnava DNA.
3. Prepoznavanje okužbe.

Ta študija zahteva posebno medicinsko opremo - ojačevalno. Opremljen je s kamero, kjer proučevani materiali medsebojno delujejo z visokimi temperaturami in kemičnimi encimi. Na izhodu ima laboratorijski tehnik dolgo verigo DNA povzročitelja, če je v človeškem telesu.

Kako se pripraviti na diagnozo

PCR analiza je kompleksen proces genskega inženiringa, ki zahteva natančnost in resnost laboratorijskih tehnikov in bolnikov. Veliko vlogo pri pravilnosti rezultatov analize ima priprava na postopek, tj. Pravilno zbiranje materiala.

Glavni viri informacij o bolezni so:

Lahko se uporabijo druge možnosti, če je potrebno, se tekočine odvzamejo za analizo iz različnih organov.

Za pacienta obstajajo določena pravila, ki jih je treba upoštevati pred postopkom. Če se opravi krvna preiskava, je prepovedana 8 ur pred zbiranjem:

• jesti hrano;
• kajenje;
• Alkoholne pijače;
• jemljete zdravila znotraj.

Zvečer, preden zberemo izpljunek, se zdravilo napije, da ga razredči in olajša izkašljevanje. Zjutraj zberite material po temeljiti higieni ustne votline.

Urin se zbere zjutraj v sterilnem kozarcu na prazen želodec, po pranju, preden vzamete katerokoli zdravilo.

Če oseba jemlje antibiotike, je treba analizo verižne reakcije s polimerazo preložiti, sicer rezultat PCR ni zanesljiv. Sputum ali kri naj se daruje dva tedna po koncu zdravljenja.

Kako poteka postopek identifikacije bakterij

Na kratko, postopek je izolirati del DNA. Uporaba sodobnih metod genskega inženiringa nam omogoča določitev vrste mikroorganizma. Poleg tega material za analizo potrebuje majhno količino.

Tehnično je to zelo zapleten postopek, vendar traja manj časa kot klasične bakteriološke študije. Patogenov ni treba izolirati iz biomateriala, zato jih ni treba gojiti več tednov. Na dan dostave lahko bolnik že pozna rezultate svoje analize.

Celoten postopek PCR poteka v fazah: t

1. Delo poteka s primarno obliko DNA, ki je pri visoki temperaturi, blizu 100 stopinj, razdeljena na dve verigi.
2. Temperatura se zmanjša, niti so povezane z fragmenti nukleinske kisline - primerjem.
3. Pojavi se raztezek - sinteza molekularne strukture.

Celotna seja je sestavljena iz približno trideset takšnih postopkov, ki ponavljajo cikel kot verižno reakcijo. To je potrebno, da se ustvari število celic, v katerih postanejo bakterije prepoznavne.

Zaključek študije

Opis rezultata PCR (verižna reakcija s polimerazo) daje zdravniku tuberkuloze preprosto ali razporejeno. V prvem primeru bo opis vseboval samo informacije o prisotnosti ali odsotnosti Kochovih palic. Če je dekodiranje podrobno, lahko iz njega ugotovite obseg bolezni, njeno osredotočenost. V skladu s temi merili je mogoče določiti najprimernejše zdravljenje tuberkuloze v vsakem primeru.

Analiza polimeraze verižne reakcije ne razlikuje med živimi in mrtvimi patogeni in govori le o njihovi prisotnosti. Zato je smiselno opraviti drugi test za tuberkulozo le 3-4 tedne po prehodu zdravljenja, ki ga je predpisal zdravnik.

Če je rezultat pozitiven, se na zaključek vpiše napis »Mycobacterium tuberculosis«. Če je rezultat negativen, poleg biološkega imena bakterije obstaja oznaka "ni zaznana". Analize so lahko napačne. To se zgodi redko - v primeru kršitve tehnike izvajanja PCR študij ali v prisotnosti neaktivnih mikroorganizmov. Končni sklep o bolezni lahko da le zdravnik za tuberkulozo.

Prednosti metode

PCR diagnostika tuberkuloze je postala priljubljena zaradi mnogih razlogov. Ima veliko prednosti, vključno z:

1. Natančnost raziskav. Pri analizi tehnologije je mogoče identificirati bakterije, tudi če so prisotne v majhnih količinah.
2. Hitri rezultat. Celoten postopek od zbiranja materiala do končnega zaključka traja približno 5 ur. V primerjavi s setvijo mora počakati nekaj tednov.
3. Popolna varnost za osebo, za razliko od fluorografije s sevanjem.
4. Uporabi se vsak tekoči biomaterial. Za PCR pri pljučni tuberkulozi je najbolj natančna informacija sputum, pri tuberkuloznem meningitisu pa vzamemo vzorec iz hrbtenjače. Krvni test pomaga identificirati lokalna žarišča okužbe.
5. Testira se občutljivost bakterij na antibiotike. To vam omogoča predpisovanje pravilnega zdravljenja.
6. Zgodnja diagnoza. O prisotnosti bolezni lahko izvedete pred nastopom simptomov.

Poleg pozitivnih vidikov obstajajo tudi slabosti. Glavni je cena. Analiza PCR ni poceni, kar je povezano z uporabo drage opreme. Še ena pomanjkljivost je, da je treba po poteku zdravljenja tuberkuloze čakati na čas ponovnega testiranja. Včasih je rezultat testa napačen. To se zgodi zaradi bakterijske mutacije.

Ko je potrebna PCR

PCR za pljučno tuberkulozo nima kontraindikacij in je popolnoma varen. Zato obstajajo določene situacije in bolezni, kadar je to edina možnost raziskav.

Te vključujejo:

• nosečnost;
• stik s tuberkuloznim pacientom;
• težave pri določanju diagnoze pljučne bolezni;
• pregled pred operacijo;
• alergijska reakcija;
• Okužba s HIV;
• mladih.

Lahko uporabite metodo PCR v smeri, ki je izdana v ftiologiji, kot tudi pediater, zdravnik ali pulmolog.

Kaj lahko nadomesti PCR diagnozo tuberkuloze

Druge vrste raziskav niso zastarele, ampak se še naprej uporabljajo. Uporabljajo se v primerih, ko ni mogoče izvesti PCR za tuberkulozo. Poleg tega sodobna metoda ni idealna, včasih se njeni kazalniki dvomijo in zahtevajo ponovno preverjanje.

Naslednje metode pomagajo določiti prisotnost tuberkuloze pri osebi:

• tuberkulinska diagnoza (Mantoux);
• fluorografija;
• testiranje biološkega materiala za floro;
• rentgenska pljuča.

Te študije so brezplačne in dostopne vsem. Vendar imajo svoje pomanjkljivosti:

• Tuberkulozni test povzroča alergije. Kontraindicirana pri kožnih boleznih.
• Rentgenske študije spremlja sevanje, ki ne velja za otroke, osebe z imunsko pomanjkljivostjo in nosečnice.
• Bakteriološke analize trajajo veliko več časa, rezultat lahko čakamo do enega meseca.

Alternative niso jamstvo za sto odstotno pravilen zaključek. Najpogosteje se uporabljajo v preventivne namene. Diagnoza tuberkuloze s PCR daje najbolj zanesljive informacije. Če je mogoče, ga je bolje uporabiti.

Posebnosti tuberkuloze pri otrocih in potreba po PCR

Otroka je treba posebej zaščititi pred boleznijo - okužba s tuberkulozo lahko povzroči resno škodo telesu s še ne popolnoma oblikovano imuniteto.

Po vstopu Kochove palice v otroški organizem, razvoj bolezni poteka skozi naslednje faze:

• Latentno. Traja do enega leta, brez kakršnih koli simptomov.
• Intoksikacija. Vpliva na splošno zdravje. Pojavi se šibkost, apatija, pomanjkanje apetita, zaspanost in zmanjšana zmogljivost. Nenehno povišana temperatura.
• Primarna oblika bolezni. Tuberkuloza je lokalizirana in je v središču bolezni. Otrok ima kašelj, težko dihanje, glavobol, otekle bezgavke.
• Tuberkularni bronhoadenitis. Simptomi so bolečine v lopaticah, kašelj z različnimi stopnjami zvoka, hripanje.

Običajno se tuberkulin injicira za identifikacijo okužbe pod kožo otroka. Če je ta vrsta pregleda kontraindicirana, potem je PCR za tuberkulozo nepogrešljiva možnost za diagnozo. Otroci običajno opravijo krvni test, vendar se sputum po potrebi zbira. Pri najmanjšem sumu na prisotnost tuberkuloze se izvajajo dodatne študije, da se zagotovi pozitiven rezultat in takoj začne z zdravljenjem v zgodnji fazi, kar preprečuje razvoj bolezni.

Sodobne raziskovalne metode so vedno hitrejše in zanesljivejše. Škoda je, da zaradi drage opreme za izvedbo takšnih testov obstaja možnost ne v vseh zdravstvenih ustanovah in krajih. Kakšen način vodenja pregleda običajno izbere zdravnik, pacient pa ima pravico do izbire. Če ste morali opraviti test PCR, nam to povejte v komentarjih. Če je bil članek koristen za vas, ga delite v družabnih omrežjih - morda bo pomagal vašim prijateljem.

Kaj je PCR za tuberkulozo in kako narediti test?

PCR za tuberkulozo se predpiše, kadar ni mogoče postaviti diagnoze ali je nemogoče izvesti druge študije. Analiza omogoča identifikacijo Kochove palice v najzgodnejših fazah in pravočasno začetek zdravljenja.

Opis PCR za tuberkulozo

Indikacije za PCR diagnostiko

Vrste PCR za tuberkulozo

Priprava analize

Kako je PCR za tuberkulozo

Interpretacija rezultatov raziskav

Posebnosti PCR za tuberkulozo pri otrocih

Koliko stane PCR za tuberkulozo?

Komentarji in ocene

Opis PCR za tuberkulozo

PCR (verižna reakcija s polimerazo) za tuberkulozo je natančna analiza, ki lahko v nekaj urah zazna Kochovo palico. Diagnostika temelji na metodah genskega inženiringa. Zdravniki izolirajo DNA celico z uporabo gensko-molekularnih testov za določitev vrste patogenov.

Prednosti metode

• omogoča identifikacijo patogena v zgodnjih fazah, brez manifestacije vidnih simptomov;
• diagnostika nima kontraindikacij in je dovoljena otrokom;
• raziskave se lahko izvedejo ob sprejemanju minimalne količine materiala.
• univerzalnost raziskav biomaterialov;
• Študija je učinkovita pri določanju ponovitve bolezni.

Slabosti metode

Poleg prednosti imajo PCR študije tudi slabosti.

Glavni so:

1. Študija ni povsod, kamor bi lahko šli. Ker je oprema za takšno diagnozo draga, je nameščena v plačanih laboratorijih.
2. PCR za tuberkulozo lahko da pozitiven odziv, če zazna mrtve mikobakterije, na primer po zdravljenju.
3. Mutacije patogenov znatno zmanjšajo učinkovitost metode PCR, saj verige DNA niso sposobne zaporedno sintetizirati.
4. Potreba po skrbni izbiri biomateriala za analizo.

Indikacije za PCR diagnostiko

Pošljite anketi za naslednje navedbe:

1. Če je bil vsaj enkraten stik s pacientom s tuberkulozo in je težko identificirati bolezen z uporabo standardnih testov.
2. V nekaterih primerih ni mogoče pripeljati osebe na rentgenske posnetke ali druge študije. V takšnih primerih je veliko lažje dostaviti izpljunek.
3. Analiza se določi na predvečer naslednjega operacije, ko je treba ugotoviti, ali je oseba bolna ali ne.
4. Če ima bolnik dvomljiv rezultat reakcije Mantoux.
5. Določite nosečnicam in otrokom, da se izognete izpostavljenosti rentgenskim žarkom.

Vrste PCR za tuberkulozo

Izbira biomateriala za presejanje za tuberkulozo je treba določiti individualno.

Za diagnozo PCR za tuberkulozo se lahko opravijo testi:

Krvni test

Značilnosti krvnega testa za tuberkulozo:

1. Opravljene v primerih, ko druge diagnostike niso primerne ali kontraindicirane. Na primer, za pravilno diagnozo morate vzeti več kot eno rentgensko sliko. Prekomerna izpostavljenost ni varna za telo, zato je veliko lažje jemati kri od bolnika.
2. Tudi zdravnik lahko daje smer krvi, ko dobi kontroverzne rezultate po fluorografiji.

Analiza sline

1. Analiza sline je manj priljubljena in informativna kot druge študije, saj tuberkuloza ne vpliva na žleze slinavk. Zato bo v večini primerov rezultat negativen.
2. Metoda je namenjena identifikaciji pljučnih in zunajpljučnih oblik.
3. Če se barva vzorca ne spremeni pod vplivom reagenta, to pomeni, da ni patogenov. Če se kljub temu pojavi sum bolezni, se izvede dodaten kompleks analiz.

Analiza sputuma

Analiza sputuma je najbolj informativna za odkrivanje patogenov tuberkuloze. Vzorci se vzamejo večkrat, praviloma trikrat. To odpravlja možnost napak pri pridobivanju materiala slabe kakovosti.

Če je oseba okužena s tuberkulozo, se sputum v majhnih količinah sprosti skupaj s kašljem. Pri bolnikih v poznejši fazi bolezni se bo sluz izločala s krvavimi obliži.

Ni priporočljivo jemati sputuma za pregled, če ima bolnik sum na tuberkulozo kosti ali živčnega sistema.

Analiza urina

Analiza urina je eden od načinov za odkrivanje zunaj pljučnih oblik bolezni: ledvična tuberkuloza in urinarni sistem.

V primeru pljučne oblike bolezni je splošna analiza urina praktično neinformativna, saj niso opažene izrazite patološke spremembe.

Iz videa boste izvedeli, kateri zdravnik postavlja diagnozo tuberkuloze. Posnet s kanalom tuberculum. ru.

Priprava analize

Pri sprejemanju krvne preiskave mora PCR upoštevati nekatera pravila, da se doseže zanesljiv rezultat:

• Priporočljivo je, da opravite analizo na prazen želodec;
• izključiti alkohol na predvečer raziskave;
• antibiotiki morate končati 15–20 dni pred analizo;
• Priporočljivo je, da se eno uro pred odvzemom krvi ne kadijo.

Pri jemanju izpljunka za pregled se priporoča tudi upoštevanje nekaterih pravil:

• material se zbira zjutraj, zato zobje predčistijo in ustno votlino temeljito sperejo;
• če se izpljunek ne premakne dobro, je priporočljivo vzeti ekspektorans zvečer ali vdihavati;
• 15 dni pred pregledom je treba prekiniti jemanje antibiotikov.

Za pridobitev zanesljivega rezultata analize urina je priporočljivo, da bolnik upošteva naslednja pravila:

• gradivo je treba zjutraj zbrati;
• na predvečer ni priporočljivo jesti hrane, ki lahko spremeni barvo tekočine (rdeče pese, borovnice in druge);
• 15 dni pred pregledom prenehajte jemati antibiotike.

Kako je PCR za tuberkulozo

Značilnosti vnosa materiala:

1. Z bolnikom se zjutraj iz vene v laboratoriju odvzame krvni test.
2. Za dostavo izpljunka na sluz je nujno potrebno iz grla in po možnosti brez velike količine sline. Njen bolnik mora pljuvati v posebno sterilno posodo, nato pa jo predati v študijo.
3. Zdravniki s sluznice obraza s posebnim orodjem.
4. Urin je najet v posebni posodi. Vzemite srednji del jutranjega dela.

Molekularno genetsko reakcijo s PCR izvajamo s posebno napravo, imenovano ojačevalnik. Za preučevanje potrebnih segmentov DNK, ki začne sintezo molekul.

Tehnika je sestavljena iz štirih stopenj:

1. Na začetku se zbirajo potrebni biomateriali za raziskave (kri, sputum in slina).
2. Nato se vzorec segreva pri temperaturi do 98 stopinj in ne več kot dve minuti. Tako se primarna oblika genetike DNA uniči in nastanejo dve verigi.
3. Sledi žarjenje ali znižanje temperature, zaradi česar se premaz veže na verigo DNA.
4. Zadnja faza se imenuje raztezek. To je sinteza molekul, ki vodi do končnega rezultata.

Morate preživeti 25-30 takih ciklov, da dobite določeno število kopij DNA virusov. Vzročnike bolezni določajo sami.

Vsebina informacij in zanesljivost PCR diagnostike je 100%.

Interpretacija rezultatov raziskav

Čas izdelave analize je približno 5-6 ur.

Diagnostika po metodi PCR daje 2 različici rezultatov:

1. Odkrito. V materialu, ki smo ga raziskovali, smo odkrili DNA tuberkuloznega sredstva. Verjetnost okužbe je 97%. Takšni bolniki se hitro pošljejo v ambulanto za tuberkulozo, kjer se opravi zdravljenje.
2. Ni zaznano. Negativni odziv kaže na odsotnost povzročitelja.

Če je rezultat pozitiven, zdravnik izvede podrobno dekodiranje, ki določa stopnjo in žarišče bolezni.

Fotogalerija

Posebnosti PCR za tuberkulozo pri otrocih

PCR je predpisan, če je rezultat testa Mantoux negotov ali ob najmanjšem sumu okužbe. Zagotavljanje postopka je varno za otroke.

PCR diagnoza tuberkuloze pri otrocih in odraslih: indikacije za

Svetovna zdravstvena organizacija je pred dvajsetimi leti priznala, da je stopnja širjenja tuberkuloze izven nadzora in dosegla obseg epidemije. Od takrat se stanje ni izboljšalo. Vsako leto se odkrije več kot milijon primerov bolezni, od katerih je skoraj četrtina smrtna. V zadnjem desetletju se je stopnja pojavnosti pri otrocih povečala, večina oblik bolezni ni primerna za standardno antibiotično zdravljenje.

Danes je ena od globalnih nalog za medicino razvoj takšnih diagnostičnih metod, ki bodo omogočile identifikacijo patologije pred nastopom izrazitih kliničnih simptomov. Ena izmed njih je verižna reakcija s polimerazo (PCR) za tuberkulozo, ki pomaga pri odkrivanju Kohovih bolezenskih palic v krvi, sputumu in drugih bioloških tekočinah.

Diagnoza tuberkuloze

Presejalni testi so namenjeni odkrivanju bolnikov, nosilcev tuberkuloze in preprečevanju širjenja okužbe v družbi. Za otroke, mlajše od 14 let, se Mantoux test uporablja množično. To je imunološki test, pri katerem se subkutano injicira odmerek tuberkulina - kompleksna mešanica genskega materiala več vrst mikobakterij. Pojav izrazite reakcije kaže na aktivno pojavljanje infekcijskega procesa.

Za preventivni pregled pri odraslih s fluorografijo ali rentgenskimi žarki. Te metode pomagajo vizualizirati patološke lezije v pljučnem tkivu. Vendar pa povzroča težave pri diferenciaciji tuberkuloze od druge organske patologije (maligne in benigne neoplazme, vnetni procesi, parazitske invazije, poklicno poškodbo pljuč).

Za pojasnitev strukture in velikosti patološkega žarka so potrebne dodatne instrumentalne študije:

• ciljno radiografijo;
• računalniška tomografija;
• slikanje z magnetno resonanco.

Metode za diagnozo tuberkuloze

V primeru dvomljivih rezultatov in za imenovanje ustreznega zdravljenja je potrebno natančnejše diagnostične metode, ki omogočajo izolacijo patogena. Mikroskopsko in bakteriološko preiskavo sputuma uporabljamo za dolgotrajno potrditev pljučnih oblik tuberkuloze.

V zadnjih letih je pogostejša pojavnost mikobakterij različnih organov in sistemov - ledvic, kosti, črevesja, kože. Za identifikacijo teh oblik tuberkuloze, ultrazvočnih preiskav, kulture urina in blata se lahko uporabijo endoskopske preiskave.

PCR diagnostika za tuberkulozo bo pomagala potrditi prisotnost kohovih palic v krvi, pa tudi njeno občutljivost na določene droge. To je zelo učinkovita metoda, ki temelji na odkrivanju bakterijskega genskega materiala v različnih bioloških tekočinah.

Specifičnost in indikacije

Polimerazna verižna reakcija je zelo občutljiva mikrobiološka diagnostična metoda, ki temelji na načelih genskega inženiringa. Za potrditev prisotnosti patogena v biološkem materialu zadostuje, da se za to odkrije edinstveni fragment nukleinske kisline. PCR za tuberkulozo lahko zazna bakterije v krvi, izpljunku, urinu.

Trenutno je razvitih več analiznih metod. Najbolj priljubljeni med njimi so:

• PCR v realnem času;
• mikrofluidna tehnologija;
• sekvenciranje in pirosekvenciranje.

PCR v realnem času

Laboratoriji najpogosteje uporabljajo verižno reakcijo s polimerazo v realnem času, saj zmanjšuje število lažno pozitivnih rezultatov, proces analize pa traja kratek čas.

Glede na veliko število skritih oblik bolezni in neučinkovitost standardnih diagnostičnih metod se PCR vedno bolj uporablja. Namen te analize je prikazan na:

• prepoznavanje sumljivih območij na rentgenskih žarkih;
• dvomljivi rezultati tuberkulinskega testa;
• nezmožnost izvajanja mikroskopske in bakteriološke analize sputuma pri osebah v resnem stanju;
• izvajanje kirurških posegov, kadar je potrebno hitro zagotoviti, da ni okužbe;
• nedopustnost uporabe fluorografije, rentgenskih slik ali računalniške tomografije (na primer pri nosečnicah in dojenju, v primeru presežne izpostavljenosti sevanju);
• sum na zunajplazemsko tuberkulozo (priporočljivo je, da se ne uporablja le kri, ampak tudi sluz).

PCR diagnostika tuberkuloze se je izkazala pri pregledu otrok zaradi pomanjkanja dodatne izpostavljenosti in hitrih rezultatov.

Postopek priprave in analize

Posebni pripravki za PCR krvi niso potrebni. Da bi se izognili zapletom vzorčenja krvi in ​​da bi dobili kakovosten material, je treba upoštevati naslednja splošna pravila: t

• analizo je treba opraviti zjutraj ne prej kot 2 uri po prebujanju;
• Omejiti je treba vnos maščob in ocvrte hrane dan pred odvzemom krvi;
• prenehajte jesti, piti čaj in kavo 8-9 ur, dovoljeno je piti čisto vodo;
• Ne kadite vsaj 3-4 ure.

V primeru trajnih zdravil (hormoni, antikoagulanti, protivnetna zdravila, antibiotiki, sredstva za redčenje krvi) morate o tem obvestiti laboratorijskega asistenta.

Po sputumu morate dobro umiti zobe in večkrat sperite usta. Zberite material v sterilni posodi. Za boljše rezultate lahko v večernih urah vzamete ekspektorans ali mukolitik.

Diagnoza je sestavljena iz več faz.

Material ograje. Izvaja se lahko v laboratoriju in na daljavo. Nekatere vrste materialov, ki jih bolnik zbira neodvisno (urin, sluz).

Uničenje strukture nukleinskih kislin (denaturacija molekul DNA in RNA). V ta namen se testni material segreje na temperaturo 98 stopinj in se zadrži nekaj minut. Posledično se dvojna vijačnica odvija, nastanejo enoverižne molekule.

Žarjenje Po dodajanju premaza (kratkega dela nukleinske kisline) se temperatura zniža za nekaj stopinj, aktivira se polimeraza.

Elognation. Temperatura se dvigne na optimalno raven, encimska aktivnost doseže maksimum in druga veriga se zaključi v skladu s Chargaffovim pravilom komplementarnosti.

Za dokončanje študije je potrebno sintetizirati potrebno število molekul DNA - približno 50 ciklov zgornje reakcije. Traja približno 2-3 ure. Pozitiven rezultat reakcije ne kaže vedno na aktivno stopnjo bolezni, temveč je pokazatelj prisotnosti mikroorganizma v telesu.

Prednosti in slabosti metode

V primerjavi z drugimi mikrobiološkimi metodami PCR ne zahteva dolgotrajnega odkrivanja Mycobacterium tuberculosis z uporabo PCR, rezultat lahko dobimo na dan testiranja.

Druga prednost je visoka specifičnost analize, ki omogoča odkrivanje prisotnosti patogena z natančnostjo 90-95% v skoraj vseh biomaterialih (kri, urin, blato, cerebrospinalna tekočina, izpljunost, zardevanje bronha).

Vendar pa obstaja več pomanjkljivosti metode:

• precej visok odstotek lažno pozitivnih rezultatov (do 15%), kar je povezano z odkrivanjem neživih mikroorganizmov;
• v nekaterih primerih lahko opustimo dejstvo bolezni, ker je Mycobacterium tuberculosis pogosto izpostavljen mutacijam in spremembam genskega materiala;
• nizka učinkovitost pri pregledu ljudi z imunsko pomanjkljivostjo;
• visoki stroški raziskav, potreba po dragi opremi in reagentih.

Kaj je mogoče zamenjati?

Zaradi raznolikosti oblik tuberkulozne okužbe je za natančnejšo diagnozo in izbiro zdravljenja potrebno združiti več diagnostičnih študij:

Obvezna analiza za otroke je Mantoux test. Če se vnos tuberkulina (genetskega materiala mikobakterij) pojavi izrazito, se lahko domneva okužba s tuberkuloznim bacilom.

Za vizualizacijo patološkega ostrenja lahko uporabimo rentgenske metode. Pri diagnozi zunaj pljučne tuberkuloze se z istočasno biopsijo uporabljajo endoskopske metode:

• bronhoskopija pomaga identificirati poškodbe grla, sapnika, bronhijev;
• kolonoskopija - črevesje;
• cistouretroskopija - organi urinarnega sistema;
• histeroskopija - ženske genitalije. Te metode niso specifične, zato je treba za natančno diagnozo določiti patogen.

Splošni klinični testi bodo pomagali natančneje določiti stanje telesa. Potrebna je popolna krvna slika z levkocitno formulo.

Povečanje števila nevtrofilcev z zmanjšano stopnjo limfocitov in povečanje hitrosti sedimentacije eritrocitov (ESR) kaže na aktivni vnetni proces bakterijske etiologije. Izključiti poškodbe organov urinarnega sistema z uporabo splošne analize urina in kulture za sterilnost.

PCR je trenutno na voljo v večini zasebnih laboratorijev. To zahteva ne le visoko usposobljene strokovnjake, ampak tudi drago opremo, veliko število reagentov. Zato je uporaba te metode omejena kljub svoji visoki natančnosti in specifičnosti.

Polimerna verižna reakcija (PCR) za tuberkulozo

Tuberkuloza je ena najnevarnejših bolezni, iz katere človeštvo trpi več sto let. Čeprav so znanstveniki znali identificirati povzročitelja in izumiti antibiotike, da bi ga odpravili, zdravljenje ni vedno uspešno. Glavni razlog je dolgo obdobje latentne ali latentne oblike bolezni, ki lahko traja več let. Pozna diagnoza pomembno zmanjša pacientove možnosti za okrevanje in polno življenje.

Kaj je PCR?

Za odkrivanje tuberkuloze mikobakterije v telesu že več kot sto let je bil uspešno uporabljen Mantoux test. Druge metode so se dobro izkazale: bakteriološka kultura v umetnem gojišču, mikroskopija po razmazu, ELISA. Vendar pa je veliko število zapletov in lažno pozitivnih rezultatov ter trajanje nekaterih metod zahtevalo uvedbo novih tehnologij v diagnostično metodologijo. Velik preboj na področju mikrobiologije je bil pojav PCR analize za tuberkulozo. Že več desetletij kaže svojo učinkovitost in se pogosto uporablja za diferencialno diagnozo različnih oblik tuberkuloze.

PCR analiza za tuberkulozo ali polimerazno verižno reakcijo je metoda za odkrivanje DNA bakterij ali njihovih fragmentov, ki temelji na povečanju molekul nukleinskih kislin pod vplivom encimske DNA polimeraze. Za pozitiven rezultat zadostuje le ena molekula patogene DNA, zato je ta metoda zelo občutljiva. Diagnoza OCP pri tuberkulozi je učinkovitejša kot sejanje mikobakterij v umetnem okolju, saj v nasprotju s kulturo omogoča razlikovanje med divjimi in cepivnimi sevi, ki so bili cepljeni z BCG. S tem se izognemo napačnim pozitivnim rezultatom in postavimo diagnozo bolj natančno.

Koristi PCR

PCR diagnostika za tuberkulozo omogoča odkrivanje Kochovega bacila v vsakem biološkem okolju organizma z določitvijo njihove kvantitativne sestave tudi v začetni fazi bolezni, ko so mikobakterije v mirovanju. Diagnoza bolezni v latentni fazi omogoča pravočasno začetek profilaktičnega zdravljenja, da se prepreči razvoj žarišč vnetja v pljučih in pojav komplikacij v drugih organih in sistemih. Poleg tega ima PCR test za tuberkulozo številne prednosti: t

• visoka specifičnost - 90-100%;
• visoka hitrost - od 4 ure do 2 dni;
• visoka občutljivost, zlasti pri imunski pomanjkljivosti;
• diferencialna diagnoza.

Glavna prednost metode je v tem, da diagnoza CRC tuberkuloze pri otrocih omogoča razlikovanje med razširjeno obliko bolezni in omejenim žariščem, tudi z negativnimi rezultati drugih testov. Diferencialno testiranje vam omogoča, da izberete pravi režim zdravljenja in povečate učinkovitost zdravljenja.

Visoka specifičnost analize je dosežena z odpravo navzkrižnih reakcij z drugimi molekulami nukleinskih kislin, visoka občutljivost pa omogoča odkrivanje mikobakterij tudi v majhni količini zbranega materiala. PCR metoda sputuma za tuberkulozo ima največjo zanesljivost, njegova specifičnost doseže 100% v primerjavi s študijo drugih bioloških materialov.

Poseben mehanizem PCR zagotavlja številne možnosti za odkrivanje kohovih palic pri bolnikih z oslabljenim imunskim sistemom. Glede na analizno metodo reakcija zazna antigene, zato ni pomembno, ali telo proizvaja protitelesa proti patogenu ali ne. Tako je možno diagnozo zunaj pljučnih oblik bolezni in napredovalnih primerov pri bolnikih z nepravilnostmi v imunskem sistemu, ki ni mogoče z drugimi metodami, diagnosticirati.

Slabosti metode

Kljub številnim prednostim in visoki občutljivosti testa lahko PCR za tuberkulozo daje lažno negativen rezultat. Ker se za diagnozo vzame zelo majhna količina biomateriala, dejstvo, da se patogen »skriva« v celični ali vnetni fokus, ni izključeno in se ne sprosti zunaj.

Občutljivost te metode pri otrocih je 25–80%. Na primer, v randomizirani študiji v skupini bolnikov s klinično dokazano diagnozo je PCR krvni test za tuberkulozo dala pozitiven rezultat le pri 50% bolnikov. V zvezi s tem pri testiranju otroka na patogene mikobakterije ni mogoče nadomestiti ene diagnostične metode z drugo. Da bi v celoti preverili odsotnost okužbe, je treba izvesti obsežno študijo na več načinov hkrati.

Postopek zbiranja

Glavni pogoj za zanesljivost PCR diagnostike je skladnost s pravili za zbiranje bioloških tekočin za analizo. Onesnažen ali nepravilno zbran material lahko povzroči nepravilne rezultate. Najpogostejši so analiza izpljunka, krvi in ​​urina, vendar za globljo diferencialno diagnozo lahko vzamete vzorce iz vsebine želodca, sinovialne tekočine, cerebrospinalne tekočine, bronhialne tekočine, sperme, izločanja prostate.

PCR za tuberkulozo v urinu jemljemo zjutraj po zunanji spolni higieni z uriniranjem v sterilno posodo. Med postopkom je pomembno, da se ne dotaknete notranjih sten vsebnika, da preprečite vdor mikroorganizmov tretjih oseb. Ženske, ki živijo redno spolno življenje, bi morale v vagino zagotovo postaviti tampon, da se izognejo tretjim osebam.

Krvni test se izvaja zjutraj na prazen želodec, PCR sputuma za tuberkulozo pa se lahko opravi ob katerem koli času dneva z obvezno predhodno ustno higieno. To je potrebno za odstranitev ostankov hrane, ki lahko vstopijo v posodo. Pri izkašljevanju izpljunka je pomembno preprečiti vdor sline in sluzi iz nazofarinksa v posodo, kar lahko izkrivlja podatke analize.

Študija vsebine želodca poteka v bolnišnici zgodaj zjutraj, medtem ko je sputum čez noč pogoltnil v želodcu. Da bi odkrili mikobakterijo tuberkulozo, ta metoda omogoča trikratno sejanje, kar najverjetneje omogoča izolacijo kohovega bacila.

Rezultati dekodiranja

Kvalitativna analiza PCR daje 2 vrsti "zaznanih" ali "nezaznanih" rezultatov. Označujejo pozitivno in negativno razsodbo. Odgovor "zaznano" pomeni, da je DNK infekcijskega povzročitelja prisotna v testnem vzorcu in da je telo z 97% verjetnostjo okuženo s tuberkulozo. Negativen rezultat kaže na odsotnost Kochove palice v vzorcu biološkega materiala in 97% možnost, da telo nima velikega števila mikobakterij, in 60%, da oseba ni okužena.

Največja specifičnost za diagnozo tuberkuloze je krvni test in sputum. S pozitivnim rezultatom kažejo na okužbo telesa, kar zahteva nujne terapevtske ukrepe. Študije drugih biomaterialov ne kažejo na potek bolezni, ampak samo na prisotnost tujih bakterij. To se zgodi, ko je oseba nosilec bolezni, ne pa širjenja okužbe v okolje in ne okuži zdravih ljudi.

Kvantitativna PCR analiza se izvaja redkeje, zdravnik pa se ukvarja z dekodiranjem njegovih rezultatov. Raziskovalni kazalniki se uporabljajo za določanje aktivnosti bolezni in stopnje poškodbe telesa. Na podlagi pridobljenih podatkov lahko specialist določi učinkovitost zdravljenja in, če je potrebno, prilagodi terapevtsko shemo.

Tuberkuloza je bila in ostaja ena najresnejših težav za zdravje vsega človeštva. Sodobne diagnostične metode lahko odkrijejo bolezen v zgodnji fazi, da se lahko začne zdravljenje pravočasno. Tuberkulinski test, mikroskopija brisa, kultura bakterij na umetnih hranilnih medijih so se dokazali na področju laboratorijske diagnostike tuberkuloze. Toda dolgotrajno čakanje na rezultate in večja pogostost lažno pozitivnih odčitkov so postali zastareli in v ospredje postavili naprednejše tehnologije. PCR analiza je zelo specifična in zelo učinkovita metoda za diagnosticiranje tuberkuloze. Njegovi rezultati so najbolj zanesljivi med vsemi predlaganimi laboratorijskimi metodami za odkrivanje kohovih palic. Omogoča ne le dokončno razsodbo, temveč tudi izvedbo potrebne diferencialne diagnoze.

Polimerazna verižna reakcija za tuberkulozo

Analiza PCR za tuberkulozo vam omogoča identifikacijo bolezni v vseh fazah razvoja z minimalnim številom mikobakterij ali celo, če so v človeškem telesu fragmenti DNA patogena.

Kaj je PCR?

PCR se je pojavil relativno pred kratkim. Leta 1983 je to metodo ustvaril ameriški mikrobiolog Carey Mullis, za katerega je prejel Nobelovo nagrado. Osnova PCR je ponavljajoče se podvajanje določenega območja DNK s pomočjo encimov in vitro. Posledica tega je, da je patogena DNA modna za vizualizacijo tudi v svoji prisotnosti v minimalnih količinah (sledovi prisotnosti). To je zlati standard specifičnosti.

Tuberkuloza PCR (proces polimerne verige) je diagnostični postopek za odkrivanje okužbe z genskim inženiringom. Ta metoda raziskovanja se uporablja v mikrobioloških, viroloških in imunoloških medicinskih laboratorijih v dvomljivem in praktično neperspektivnem smislu.

Kaj je potrebno za analizo?

Analiza zahteva 3 komponente:

• Vzorec DNA.
• Nukleotidne spojine.
• Polimerazni encim.

Analiza se predloži v laboratorij, ki jo predpiše zdravnik.

Kaj je osnova metode?

Na začetku raziskave se iz biološke tekočine ekstrahira segment mikrobne DNA.

PCR določa vrsto patogena 2–3 ure po testu. Vendar pa ga ni treba izolirati iz biološkega materiala ali dolgo časa gojiti v laboratoriju. Glavna stvar je, da je vzorec vseboval kos okužene DNA. Pri analizi tuberkuloze nastane umetna sinteza ribonukleinske kislinske infekcije in vitro. Zaradi hitre reakcije po nekaj urah lahko dobite zanesljiv rezultat.

Faze diagnoze

Tuberkuloza PCR je preprosta diagnostična metoda, ki vam omogoča, da dobite odgovor v kratkem času. Za določitev tbc se vzame biološki material okužene osebe (kri, sputum, biološka tekočina).

Diagnoza poteka v treh glavnih fazah:

• Po vzorčenju v laboratoriju se uniči primarna oblika DNA. Pri temperaturi 980 stopinj se 1,5 verige ločijo v 1,5 minutah.
• Na naslednji stopnji se izvede žarjenje, temperatura zraka se zmanjša za nekaj delitev, DNA se poveže s primerjem.
• Zadnja faza študije se imenuje raztezek. To je biosinteza molekul.

Za identifikacijo želene DNK z delcem okužbe lahko diagnostiko izvedemo 20-25-krat.

Ali je treba opraviti PCR za tuberkulozo?

Analiza PCR za tuberkulozo se vedno opravi, kadar obstaja potreba po njej, vključena je v standard kakovosti za pregled bolnika za tuberkulozo. Da bi jo izvedli, potrebujete le napotnico svojega zdravnika. Najpogosteje se v polikliniki uporabljajo druge diagnostične metode za ugotavljanje tuberkuloze.

Te vključujejo:

• Vprašanje in zbiranje anamneze.
• Zdravniški pregled.
• Mantoux tuberkulinski test.
• Rentgenska ali fluorografija.
• Ultrazvok.
• Mikroskopska diagnoza vzorca izpljunka.

Kljub velikemu številu diagnostičnih orodij se število okuženih vsako leto povečuje. Poleg tega je patologija pridobila nekatere značilnosti: resnost procesa, povečanje smrtnih izidov in imunost patogena na droge.

Zdravniki ne priporočajo opustitve letnega pregleda in cepljenja, saj to povečuje tveganje za okužbo. Analiza PCR ima številne prednosti, zato velja za najbolj natančno in informativno od vseh instrumentalnih metod za odkrivanje tbc in se široko uporablja v sodobnih klinikah.

Kakšna je vrednost metode?

Proces polimerne verige se pogosto uporablja v povezavi z dodatnimi metodami za odkrivanje tuberkulozne okužbe. Vrednost metode je naslednja:

• Kratek čas zadrževanja. Že po 2-3 urah po dajanju krvi je mogoče odkriti prisotnost okužbe v biološkem materialu. To je nepogrešljivo v primerih, ko obstaja vprašanje življenja in smrti, in morate določiti natančno diagnozo za kirurški poseg.
• Nekatere diagnostične metode imajo svoje kontraindikacije in ne prikazujejo vedno popolne slike diagnoze. S pomočjo PCR se patogen takoj odkrije in je možno izvesti postopek za ljudi vseh starosti.
• Kot vzorec lahko vzamete vse okužene biološke snovi. Za določitev pljučnih oblik bolezni se jemlje urin ali slino. Vzorec krvi pomaga identificirati vse oblike patologije. Za ugotavljanje tuberkuloznega meningitisa je potrebna spinalna tekočina.
• Varnostna metoda. Za raziskave je potreben le biološki material pacienta. Zato je popolnoma varen in neškodljiv postopek za otroke in odrasle, za razliko od fluorografije, ki se izvaja od 18. leta starosti, in Mantoux, ki povzroča negativne reakcije v telesu.
• Visoko občutljiv test. Omogoča identifikacijo patologije tudi v zgodnjih fazah razvoja, ko virus še ni prizadel vseh celic telesa.
• Učinkovita metoda za diagnozo ponovitve patologije.
• Inovativni način za identifikacijo Kochove palice od prvih dni njegovega razvoja. To vam omogoča, da hitro začnete pravilno zdravljenje in rešite osebo pred smrtjo. V zgodnjih fazah razvoja se patologija lahko popolnoma ozdravi brez zapletov.

Ta metoda diagnoze ima veliko prednosti in se aktivno uporablja v različnih zdravstvenih ustanovah. Vendar ima PCR kljub svojim prednostim tudi svoje negativne lastnosti.

Katere so slabosti?

Slabosti procesa polimerne verige so:

• Visoki stroški postopka.
• Metoda ni primerna za tiste, ki so že bili zdravljeni s tbc, saj lahko mrtve infekcijske celice dajo lažno pozitiven rezultat.
• Ko je mutacija celic DNA lahko napačen rezultat.
• Strokovnjak mora pravilno vzeti potrebni biološki material za določitev vrste okužbe in kraja njegove lokalizacije.
• Ni vedno dovoljeno za bolnike s pljučno boleznijo.

Kdo prikazuje analizo?

Najpogosteje je taka analiza dodeljena:

• • Če so rezultati Mantoux-a dali dvomljive podatke, se iz vene vzame kri za tuberkulozo.
  • Bolnik je bil v stiku z okuženo osebo, vendar zdravniški pregled ni pomagal določiti pravilne diagnoze.

• Med nujno operacijo, pri kateri morate v najkrajšem času vedeti, ali je bolnik okužen.
• Med nosečnostjo, ko druge diagnostične metode ne morejo dati natančnega rezultata brez škode za plod.

Po pregledu vseh prednosti in slabosti diagnosticiranja tbc, lahko sklepamo, da je najbolje uporabiti več diagnostičnih metod za natančno diagnozo. To bo pomagalo zagotoviti, da je okužba v telesu in na kateri stopnji napredovanja. Po pravilni določitvi diagnoze bo mogoče začeti hitro konzervativno zdravljenje in rešiti osebo pred smrtjo.

PCR diagnoza tuberkuloze

Tuberkuloza je specifična okužba, njen poudarek je lahko v človeških tkivih več let, nato pa se razširi več mesecev. To je kronična bolezen, katere optimalne sheme zdravljenja je težko izbrati. Eden od razlogov za to je pozna diagnoza, ko so se mikobakterije v človeškem telesu že prilagodile številnim zdravilom.

Katere sodobne metode diagnoze obstajajo? PCR diagnostika - kaj je to? Kako poteka ta raziskava? V katerih primerih je tuberkuloza diagnosticirana s to metodo in kaj je njeno bistvo?

Kaj je PCR diagnostika

To je ena od najsodobnejših metod diagnosticiranja ne le bolezni, ampak tudi odkrivanje biološkega materiala. PCR diagnostika je bila odkrita relativno pred kratkim. Pred približno tridesetimi leti, leta 1983, je ameriški biokemik, Carey Banks Mullis, predlagal kompleksno obnovitev biološkega materiala mikroorganizmov v enem kratkem segmentu. Zahvaljujoč njegovemu odkritju je znanstvenik prejel najvišjo nagrado - Nobelovo nagrado.

Kaj je to - PCR diagnosticiranje okužb? Polimerna verižna reakcija (PCR) je diagnoza odkrivanja virusnih bolezni, ki temelji na metodah genskega inženiringa. Široko se uporablja v medicinski mikrobiologiji, imunologiji in virologiji. Metoda je univerzalna in pomaga pri postavitvi diagnoze z majhno količino materiala. Okužbo je mogoče zaznati dobesedno v prvih urah okužbe z njim, še preden se pojavijo prvi simptomi bolezni.

Metoda je sestavljena iz pridobivanja iz materiala bolne osebe ne samega patogena, temveč fragmentov genoma (delcev DNA), njegove biosinteze z naknadnim določanjem, v kateri razred mikroorganizmov spada genski material z molekularno genetskimi metodami.

Kljub temu, da je to zapleten proces, je potrebnih veliko manj časa kot mnogi biološki načini odkrivanja povzročiteljev infekcij. V samo nekaj urah lahko mikroorganizem odkrijemo s PCR. Da bi to dosegli, ga ni treba izolirati od okolja (krvi, cerebrospinalne tekočine, izpljunka) in ga dolgo časa gojiti na umetnih hranilnih medijih. Dovolj je, da je v preučevanem materialu prisoten majhen fragment DNA verige infekcijskega povzročitelja.

Osnova reakcije je možnost, da se pri umetnih pogojih (in vitro) ustvari sinteza molekul nukleinskih kislin infekcijskega povzročitelja.

Kaj je potrebno za PCR?

1. Prajmerji so segmenti DNA, iz katerih se začne biosinteza ali ustvarjanje.
2. Nukleotidi ali kompleksne spojine, ki so osnova molekule DNA ali RNA.
3. Polimerazna verižna reakcija je nemogoča brez prisotnosti polimeraze, ki je encim, ki pospešuje PCR.

Faze diagnostike PCR

Kako se molekularna diagnostika izvede s PCR? Postopek je preprost in traja kratek čas ob upoštevanju zbiranja materiala.

1. Pred začetkom študije vzamejo potrebni biološki material - to je bronhialna pralna voda, kri, želodčna vsebina, sputum. Vrsta biološkega materiala je odvisna od domnevnega patogena.
2. Denaturacija ali uničenje primarne strukture DNA, ki je sestavljena iz dveh verig. Bistvo te faze je ločiti dve verigi pod vplivom visoke temperature (maksimum je 98 ° C, ki traja največ dve minuti).
3. V naslednjem koraku PCR, imenovanem žarjenje, se temperatura zniža za nekaj stopinj, tako da se bo premaz vezal na verigo DNA.
4. Raztezek, med katerim poteka sinteza želenih molekul neposredno.

Posledično samo 25-30 takih ciklov prejme potrebno število kopij DNA mikroorganizmov, ki jih je enostavno prepoznati.

Ali PCR zahteva diagnozo tuberkuloze?

Absolutno vseh oseb s sumom na tuberkulozo ni mogoče izvajati PCR, ker metoda zahteva drago opremo. Vse javne klinike si ne morejo privoščiti. Poleg tega se je zgodilo, da se običajne metode diagnosticiranja okužbe v večini primerov prav tako upravičujejo.

Te vključujejo:

• anketa bolnikov, zgodovina;
• popoln pregled osebe;
• študijo z Mantoux tuberkulinskim testom;
• radiografija ali fluorografija;
• po potrebi računalniška diagnostika;
• mikrobiološke metode raziskovanja: mikroskopija po razmazu in bakteriološka preiskava izpljunka.

PCR za tuberkulozo se izvaja v posebnih primerih, ko je težko postaviti diagnozo ali pa ni mogoče izvesti drugih instrumentalnih metod.

Kljub obilici diagnostičnih metod se pojavnost tuberkuloze še naprej povečuje. Trenutno ni le njena rast, temveč tudi druge značilnosti:

• bolezen se pogosto pojavi v hudi obliki;
• povečuje se število smrtnih primerov;
• vedno bolj odporni na sodobno kemoterapijo so diagnosticirane oblike bolezni.

Nerazumljivost ljudi, da se vsako leto redno zdravniško pregledajo, zavračanje cepljenja vodi do širjenja tuberkuloze. V takih razmerah potrebujemo hitre, informativne in učinkovite raziskovalne metode, ki bi morale biti dostopne otrokom in odraslim. Vse zgoraj navedene diagnostične metode so veliko slabše od PCR.

Koristi diagnosticiranja tuberkuloze s PCR

Ta raziskava, čeprav nova, se je dobro izkazala, zlasti v spornih primerih, kjer ni mogoče postaviti diagnoze iz več razlogov.

Zahvaljujoč PCR je veliko lažje odkriti povzročitelja tuberkuloze v testnem materialu.

Prednosti PCR diagnostike so naslednje.

1. To je hitra analiza. Majhen fragment molekule DNA lahko uporabimo za diagnozo v samo nekaj urah (približno pet), ki se uspešno uporablja v nujnih primerih, ko je na primer pred operacijo potrebno ugotoviti, ali je oseba bolna s tuberkulozo.
2. Analiza PCR je dovoljena v primeru, ko druge metode niso na voljo ali prepovedane (za odkrivanje pljučne tuberkuloze, včasih je potrebno vzeti več radiografskih slik, ki bodo velike doze sevanja).
3. S pomočjo PCR se v vsakem biološkem okolju preveri prisotnost patogena v njem. Na primer, lahko izvedete študijo cerebrospinalne tekočine, če obstaja sum na tuberkulozni meningitis.
4. Dovoljena je PCR diagnoza nalezljivih bolezni pri otrocih, ker je metoda varna.
5. Omogoča identifikacijo patogena na kateri koli stopnji bolezni.
6. Visoka občutljivost PCR omogoča odkrivanje Mycobacterium tuberculosis, čeprav je v biološkem materialu le nekaj mikroorganizmov.
7. Dobro je opraviti diagnozo ponovitve bolezni.

Po vsem prebranem PCR-ju se zdi skoraj popolna diagnostična metoda, ki naj bi vsakdo z sumom na tuberkulozo. Vendar pa obstajajo tudi slabosti, ki jih je treba upoštevati.

Pomanjkljivosti PCR pri diagnozi tuberkuloze

V našem času je takšna diagnostika redkejša od pravilnosti. In za to obstaja razlog.

1. To je draga raziskovalna metoda. V mnogih klinikah je oprema za PCR odsotna zaradi visokih stroškov, vendar je analizo mogoče opraviti v plačanih laboratorijih.
2. Takoj po zdravljenju so lahko v človeškem telesu še vedno prisotne mrtve mikobakterije ali življenje v majhnih količinah (rezultat bo pozitiven med diagnosticiranjem PCR), zato bo metoda v tem času nezanesljiva, ni smiselno, da jo izvajamo.
3. Mutacije mikobakterij povzročajo neučinkovito PCR - normalne sekvence DNA ni mogoče sintetizirati.
4. Treba je izbrati pravo okolje za študijo, kri se vzame le, če obstaja sum, da je okužena (sepsa), ni potrebe po jemanju izpljunka, če obstaja vprašanje tuberkuloze organov živčevja. V tem primeru PCR ne bo mogel odkriti patogena in diagnoza bo neinformativna.

Indikacije za odkrivanje tuberkuloze z analizo PCR

PCR diagnoza tuberkuloze se najpogosteje izvaja v spornih primerih. Kdaj zdravniki napotujejo na to študijo?

1. Če je težko postaviti diagnozo z običajnimi razpoložljivimi metodami, pa je prišlo do stika z bolnikom s tuberkulozo.
2. V primeru, ko oseba ne more biti dostavljena na kliniko, da bi opravila rutinske rutinske teste za tuberkulozo, je lažje pregledati z uporabo PCR, ker se lahko sputum za test prenese v kozarec in diagnoza potrdi v nekaj urah.
3. Če bo oseba opravila nujno operacijo in je nujno ugotoviti, ali je bolan s tuberkulozo.
4. Če je potrebno, je nosečnica bolje preiskati tudi tuberkulozo z uporabo PCR, ker je metoda varna.
5. Vsakdo, ki ni bil diagnosticiran s tuberkulozo, je bil potrjen z bakteriološkimi metodami in fluoroskopijo. To se zgodi, ko je lezija v pljučih neopazna v neposredni podobi, in oseba, ki je med spravljanjem izpljunka za študijo, ne more slediti priporočilom za pravilno zbiranje materiala. V tem primeru je oseba zaskrbljena zaradi vseh simptomov, značilnih za pljučno tuberkulozo.
6. Če obstajajo dvomi o rezultatih testa Mantoux.
7. Pri otrocih je priporočljivo opraviti PCR diagnozo tuberkuloze. Postopek je varen, ne povzroča dodatne izpostavljenosti sevanju in je učinkovit pri odkrivanju težko diagnosticiranih oblik bolezni.

Pravočasna diagnoza tuberkuloze je ključna za pravilno predpisano zdravljenje in zmanjšanje širjenja bolezni. Pogosto znane metode odkrivanja bolezni niso vedno učinkovite. Zato je PCR danes eden najbolj zanesljivih in varnih načinov za odkrivanje okužb v zgodnjih fazah njegovega razvoja.